Sangre oculta en heces

Determinación cualitativa de sangre oculta en heces

19.02.2020

Objetivo:

Observación de heces y determinar si es posible la presencia de sangre en ellas.

Material:

• Test NADAL
• Tubo recolector
• Muestras de heces

Procedimiento:

Tenemos dos muestras de heces en placa, una con sangre y otra sin sangre.

1. Sujetamos el tubo verticalemnte y abrimos el tapón azul. Extraemos el aplicador.

2. Recolectamos la muestra introduciendo el aplicador en tres puntos diferentes de las heces.

3. Insertamos otra vez el aplicador con la muestra y cerramos bien el tapón.

4. Agitamos bien el tubo para que lña muestra se mezcle completamente con el buffer diluyente.

5. Desenroscamos la tapa blanca protectora del tubo de recolección. Rompemos la punta mediante un movimiento giratorio utilizando un pañuelo de papel.

6. Manteniendo el tubo recolector en vertical añadimos 3 gotas de solución en el pocillo de prueba 

7. Interpretamos los resultados

Principios inmediatos

Estudio microscopico de principios inmediatos en heces

19.02.2020

Introducción

La investigación de los principios inmediatos que aparecen digeridos en las heces debe realizarse a nivel macro y microscópico.

En una primera etapa, se realiza un análisis a simple vista de las heces (macroscópico), extendiendo una porción de la muestra sobre una placa de petri y observando su consistencia, color, olor y forma. Buscamos también trozos de carne, fragmentos de felícula, grasas neutras, moco, pus y sangre que pueda darnos alguna indicación de anormalidad en la digestión. Es importante tener en cuenta la existencia de elementos que pueden entorpecer este análisis, como es la presencia de artefactos (trozos de papel o chicles que tragan los niños) o restos alimenticios dificilmente dirigibles (cubiertas plásticas de embutidos, restos vegetales, etc.)

Para un correcto análissi es conveniente quye el paciente siga una dieta normal, pero indicándole que debe contener todos los principios inmediatos: grasas, proteínas e hidratos de carbono. Esto lo hará como mínimo durante dos-tres días seguidos y la muestra se recogerá el último día.

Fundamento

En las heces podemos observar con facilidad el grado de digestión de los distintos principios inmediatos, de modo que este examen microscópico es de gran ayuda en el diagnóstico de los distintos tipos de patologías relacionadas con ek proceso de la digestión.

Material

• Tubo de laboratorio de ml
• Varilla de vidrio
• Portaobjetos y cubreobjetos
• Microscopio óptico
• Mechero
• Vortex

Reactivos

• Solución de lugol diluido al 1/3 con agua destilada
• Solución alcohólica de Sudán III (0.5g Sudan III + 45 ml de estanol 96º. calentar suavemente, dejar enfriar y filtrar)

 

• Agua destilada

Muestra

Heces frescas. Se recogerán como máximo 12 horas antes del análisis y deben conservarse refrigeradas a 4ºC.

Tecnica

1.
En un tubo de laboratorio con unos 10 ml de agua destilada o suero salino fisiológico depositamos una pequeña cantidad (del tamaño aproximado de un garbando) de las heces con la pipeta pasteur y las homogeneizamos agitano con ayuda de la pipeta y vórtex.

2.Tomamos una gota de esta disolución y la depositamos en un portaobjetos para su examen en fresco.

3.Tomamos otra gota de la dilución y la depositamos en un portaobjetos junto con una-dos gotas de lugol. Tapamos con un cubreobjetos y observamos al microscopio con un objetivo seco.

4. Tomamos otra gota de la dilución y la depositamos en el porta con una- dos gotas de Sudán III sin ácido acético. Tapamos con un cubre y calentamos suavemente sobre la llama del mechero. Observamos la preparación en caliente con un objetivo en seco.

Lectura de resultados

Observación en fresco: proteínas mal digeridas:

Porta con lugol: Hidratos de carbono:

Porta caliente: vegetales

NOTA: La muestra era de una niña de 1 año, por tanto los resultados son totalmente normales y sin presencia de ningun insuficiencia gastrica.

Sedimento urinario

Estudio del pH y sedimento urinario en orinas patológicas

(13/02/20)

Objetivo

Observar distintas muestras de orina patológicas al microscopio, para familiarizar al alumnado con los distintos tipos de cristales, artefactos y cilindros.

Se practicará el manejo con el microscopio.

Material

• Tiras reactivas de pH
• Muestras de orina
• Tubos de centrífuga
• Centrífuga
• Pipetas Pasteur
• Portaobjetos y cubres
• Microscopio

Procedimiento

1.Realizamos un examen macroscópico de las muestras y anotamos sus características.

2. Medimos el pH de las muestras gracias a las tiras reactivas u anotamos los resultados:



3. De los botes de orina, introdujimos 6ml con ayuda de una pipeta pasteur en tubos de centrífuga (tubos falcon)




4.Centrifugamos a 2.000 rmp durante 10 minutos.

5. Retiramos el sobrenadante.

6. Con el sobrenadante que hemos dejado, resuspendemos el pellet hasta obtener una pasta casi líquida.

7. Echamos un par de gotas de la muestra centrifugada a un portaobjetos.

8. Observamos al microscopio.

Observaciones:

CRISTAL DE OXALATO:

CÉLULAS EPITELIALES:

VARIEDAD DE CRISTALES Y CÉLULAS:

CRISTAL:

Bilirrubina directa

DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE BILIRRUBINA

06.02.20

Principio del método

La bilirrubina se convierte en azobilirrubina mediante el ácido sulfanílico diazotado midiéndose fotométricamente. De las dos fracciones presentes en suelo, bilirrubin-glucurónido y bilirrubina libre ligada a la albúmin, solo la primera reacciona en medio acuoso (bilirrubina directa) precisando la segunda la solunilización con dimetilsulfoóxido para que reaccione (bilirrubina indirecta). En la determinación de la bilirrubina indirecta se determina también la directa, correspondiendo el resultado de la bilirrubina total.

Significado clínico

La bilirrubina se origina por la degradación de la hemoglobina 

Es transportada del bazo al hígado y se excreta en la bilis

La hiperbilirrubinemia es el resultado de un incremento de la bilirrubinaen plasma. Causas más probables de la hiperbilirrubinemia.

Bilirrubina total: aumento de la hemólisis, alteraciones genéticas, anemia neonatal, alteraciones eritropoyéticas, presencia de drogas.

Bilirrubina directa: colestasis hepática alteraciones genéticas y alteraciones hepáticas.

Reactivos

• R1- ácido sulfanílico y ácido clorídrico
• R2- sodio nitrito

Preparación

 

Todos los reactivos están listos para su uso.

Conservación y estabilidad

Hasta la fecha de caducidad, conservar 2-8ºC protegidos de la luz

Material adicional

• Espectofotómetro
• Cubetas de 1 cm de paso de luz
• Equipamiento habitual de laboratorio.

Muestra

Suero y plasma libre de hemólisis.

Procedimiento:

1. Preparamos las condiciones de ensayo:

• Longitud de onda: 555 nm
• Cubeta: 1 cm paso de luz                                                                                  
• Temperatura: 15-25ºC

2. Ajustamos el espectofotómetro a 0 frente a agua destilada y pipeteamos en una cubeta:

3. Mezclar e incubar 5 min a 15-25ºC.

4. Leemos la absorbancia del patrón: 0.146 y la muestra: 0.103, frente al blanco de reactivo.

Cálculos

(0.103/0.146) x 0.72 = 0.50

El valor está un poco más bajo de la media.

Bilirrubina Total

Determinación cuantitativa de bilirrubina

06.02.20

Principio del método

La bilirrubina se convierte en azobilirrubina mediante el ácido sulfanílico diazotado midiéndose fotométricamente. De las dos fracciones presentes en suelo, bilirrubin-glucurónido y bilirrubina libre ligada a la albúmin, solo la primera reacciona en medio acuoso (bilirrubina directa) precisando la segunda la solunilización con dimetilsulfoóxido para que reaccione (bilirrubina indirecta). En la determinación de la bilirrubina indirecta se determina también la directa, correspondiendo el resultado de la bilirrubina total.

Significado clínico

La bilirrubina se origina por la degradación de la hemoglobina 

Es transportada del bazo al hígado y se excreta en la bilis

La hiperbilirrubinemia es el resultado de un incremento de la bilirrubinaen plasma. Causas más probables de la hiperbilirrubinemia.

Bilirrubina total: aumento de la hemólisis, alteraciones genéticas, anemia neonatal, alteraciones eritropoyéticas, presencia de drogas.

Bilirrubina directa: colestasis hepática alteraciones genéticas y alteraciones hepáticas.

Reactivos

• R1 - Ácidos
• R2- Sodio nitrito
• Calibrador Bilirubin

Preparación

 

Todos los reactivos están listos para su uso.

Conservación y estabilidad

Hasta la fecha de caducidad, conservar 2-8ºC protegidos de la luz

Material adicional

• Espectofotómetro
• Cubetas de 1 cm de paso de luz
• Equipamiento habitual de laboratorio.

Muestra

Suero y plasma libre de hemólisis.

Procedimiento:

1. Preparamos las condiciones de ensayo:

• Longitud de onda: 555 nm
• Cubeta: 1 cm paso de luz                                                                                  
• Temperatura: 15-25ºC

2. Ajustamos el espectofotómetro a 0 frente a agua destilada y pipeteamos en una cubeta:

3. Mezclar e incubar 5 min a 15-25ºC.

4. Leemos la absorbancia del patrón: 0.336 y la muestra: 0.291, frente al blanco de reactivo.

Cálculos

(0.291/0.336) x 1.17 = 1.013

El valor está entre la media.

Creatinina

Determinación cuantitativa de creatinina

30.01.20

Principio del método:

El ensayo de la creatinina esta basado en la reacción de la creatinina con el picrato de sodio descrito por Jaffé .

La creatinina reacciona con el picrato alcalino formando un complejo rojizo. El intervalo de tiempo escogido para las lecturas permite eliminar gran parte de las interferencias conocidas del método.

La intensidad de color formado es proporcional a la concentración de creatinina en la muestra ensayada.

Significado clínico:

La creatinina es el resultado de la degradación de la creatina, componente de los múculos y puede ser transformada en ATP, fuente de energía para las células.

La producción de creatina depende de la modificación de la masa muscular. Varía poco y los niveles suelen ser muy estables.

Se elimina a través del riñón. E n una insuficiencia renal progresiva hay una retención en sangre de urea, creatinina y ácido úrico.

Niveles altos de creatinina son indicativos de patología renal.

Reactivos

• R1- Ácido pícrico
• R2- Hidróxido sódico
• Calibrador de Creatinine.

Preparación 

Preparamos el reactivo de trabajo, mezclando volúmenes iguales de R1 Y R2.

 

Conservación y estabilidad

Hasta la fecha de caducidad, conservar 2-8ºC protegidos de la luz

Material adicional

• Espectofotómetro
• Cubetas de 1 cm de paso de luz
• Equipamiento habitual de laboratorio.

Muestra

Suero o plasma heparinizado.

Procedimiento:

1. Preparamos las condiciones de ensayo:

• Longitud de onda: 492 nm
• Cubeta: 1 cm paso de luz                                                                                  
• Temperatura: 37ºC/15-25ºC

2. Ajustamos el espectofotómetro a 0 frente a agua destilada y pipeteamos en una cubeta:

NOTA: La muestra se añade al lado del espectofotómetro ya que hay que medirla a los 30 segundos.

3. Mezclar y ponemos en marcha el cronómetro

4. Leemos la absorbancia al cabo de 30 segundos= 0.178 y al cabo de 90= 0.185 segundos de la adición de la muestra

Patrón a los 30"= 0.023

90"= 0.026

Cálculos

(0.185 - 0.178 /0.026 - 0.023) x 2 = 4.6

Un poco más alto que los valores de referencia.