sábado, 29 de febrero de 2020

Creatinina

Determinación cuantitativa de creatinina

30.01.20


Principio del método:


El ensayo de la creatinina esta basado en la reacción de la creatinina con el picrato de sodio descrito por Jaffé .

La creatinina reacciona con el picrato alcalino formando un complejo rojizo. El intervalo de tiempo escogido para las lecturas permite eliminar gran parte de las interferencias conocidas del método.
La intensidad de color formado es proporcional a la concentración de creatinina en la muestra ensayada.

Significado clínico:


La creatinina es el resultado de la degradación de la creatina, componente de los múculos y puede ser transformada en ATP, fuente de energía para las células.

La producción de creatina depende de la modificación de la masa muscular. Varía poco y los niveles suelen ser muy estables.

Se elimina a través del riñón. E n una insuficiencia renal progresiva hay una retención en sangre de urea, creatinina y ácido úrico.

Niveles altos de creatinina son indicativos de patología renal.

Reactivos


  • R1- Ácido pícrico
  • R2- Hidróxido sódico
  • Calibrador de Creatinine.

Preparación 


Preparamos el reactivo de trabajo, mezclando volúmenes iguales de R1 Y R2.

 

Conservación y estabilidad


Hasta la fecha de caducidad, conservar 2-8ºC protegidos de la luz

Material adicional


  • Espectofotómetro
  • Cubetas de 1 cm de paso de luz
  • Equipamiento habitual de laboratorio.

Muestra


Suero o plasma heparinizado.

Procedimiento:


1. Preparamos las condiciones de ensayo:

  • Longitud de onda: 492 nm
  • Cubeta: 1 cm paso de luz                                                                                  
  • Temperatura: 37ºC/15-25ºC

2. Ajustamos el espectofotómetro a 0 frente a agua destilada y pipeteamos en una cubeta:



NOTA: La muestra se añade al lado del espectofotómetro ya que hay que medirla a los 30 segundos.

3. Mezclar y ponemos en marcha el cronómetro

4. Leemos la absorbancia al cabo de 30 segundos= 0.178 y al cabo de 90= 0.185 segundos de la adición de la muestra
Patrón a los 30"= 0.023
90"= 0.026

Cálculos

(0.185 - 0.178 /0.026 - 0.023) x 2 = 4.6
Un poco más alto que los valores de referencia.





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