HDL Colesterol D

Determinación cuantitativa de colesterol HDL 

29.01.20

Principio del método:

Determinación directa del HDLc ( colesterol de lipoproteínas de alta densidad) sin necesidad de pretratamiento o centrifugado de la muestra. 

La determinación se realiza en dos pasos:

1. Eliminación de lipoproteínas no-HDL
2. Medición de HDLc

La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de HDLc presente en la muestra ensayada.

Significado clínico

Las partículas de HDL son lipoproteínas de alta densidad que transporta el colesterol desde los tejidos del cuerpo hasta el hígado. Debido a que las HDL pueden retiral el colesterol de las arterias y transportarñlo de vuelta al hígado para su excreción, se les conoce como el colesterol o "lipoproteína buena", ya que niveles elevados esta relacionados con un menor riesgo cardiovascular.

Un nivel bajo de colesterol HDL es considerado uno de los principales factores de riesgo cardiovascular y enfermedades de las arterias coronarias.

Reactivos

• R1
• R2
• Calibrador HDLc/LDLc

Preparación 

Los reactivos ya vienen listos para su uso

HDLc/LDLc se recostituyen añadiendo 1ml de agua destilada.

Conservación y estabilidad

Los reactivos a 2-8ºC (4 semanas)

Calibrador 20-25ºC (30 horas) o 2-8ºC (2 semanas) o -20ºC (3 meses)

Material adicional

• Espectofotómetro
• Cubetas de 1 cm de paso de luz
• Equipamiento habitual de laboratorio.

Muestra

Suero y plasma heparinizado o EDTA.

Procedimiento:

1. Preparamos las condiciones de ensayo:

• Longitud de onda: 550-650 nm
• Cubeta: 1 cm paso de luz                                                                                  
• Temperatura: 37ºC/15-25ºC

2. Ajustamos el espectofotómetro a 0 frente a agua destilada y pipeteamos en una cubeta:

 
                                      

3. Mezclar e incubar 5 min a 37ºC.

4. Añadir 100 ul de R2 a cada tubo.

4. Leemos la absorbancia del patrón: -0.071

NOTA: Como obserbamos el resultado sale negativo debido a la poca cantidad de muestra ensayada, para poder encontrar resultados razonables, deberiamos echarle 600 ul de agua destilada.