GLUCOSA-TR

PRÁCTICA 2 -DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE GLUCOSA.

OBJETIVO:

A través de la intensidad de color formado determinar la cantidad de glucosa presente en la muestra ensayada.

UTILIDAD CLÍNICA:

La glucosa es la mayor fuente de energía para las células del organismo; La insulina facilita la entrada de glucosa en las células.

La diabetes mellitus es una enferme que cursa con una hipoglucemia, causada por un déficit de insulina.

El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.

REACTIVOS:

• R1(Tampón) TRIS pH 7,4 (92 mmol/L) y fenol (0.3mmol/L)
• R2(Enzimas) Glucosa oxidasa (GOD) 15000U/l, peroxidasa (POD) y 4-aminofenazona (4-AF)(2.6 mmol/L)
• GLUCOSA CAL, patrón primario acuosso de Glucosa (100mg/dL)

PREPARACIÓN:

1. Reactivo de trabajo (RT) Disolver el contenido de un vial de R2 Enzimas en un frasco de R1 tampón.
2. Tapar y mezclar la muestra suavemente hasta disolver su contenido.

NOTA: Mantener todos los reactivos bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y evitar la contaminación durante su uso.

MATERIAL ADICIONAL:

• Espectrofotométro a 505 nm, para calcular la absorbancia de las muestras.
• Cubetas de 1.0 cm de paso de luz
• Equipamiento habitual de laboratorio: pipetas, punta de pipetas y cementerio

MUESTRAS:

• Suero o plasma, libre de hemólisis y LCR
• El suero debe separarse lo antes posible del coágulo.

NOTA: la glucosa en suero o plasma es estable 3 días a 2-8ºC

PROCEDIMIENTO:

1.Encender el espectofotrómetro, ajustalo a las condiciones anteriormente citadas y a cero frente a agua destilada.

2.Pipetear en una cubeta:

3.Mezclar e incubar 20 min  a temperatura ambiente

4.Leer la absorbancia del patrón y la muestra frente al blanco de reactivo.